Antral Follicles Count and Anti-Müllerian Hormone Levels after Gonadotoxic Chemotherapy in Patients with Breast Cancer: Cohort Study / Contagem de folículos antrais e níveis de hormônio anti-Mülleriano após quimioterapia gonadotóxica em pacientes com câncer de mama: estudo de coorte

Abstract Aim To assess ovarian reserve (OVR) by means of follicle-stimulating hormone (FSH), anti-Müllerian hormone (AMH), and antral follicle count (AFC) measurement in eumenorrheic women with breast cancer, exposed to gonadotoxic chemotherapy. Method Fifty-two women (35.3 ± 3.8 years old) with breast cancer and undergoing cyclophosphamide-containing chemotherapy were enrolled. The assessment was performed before chemotherapy (T1) and after 2 (T2) and 6 months (T3). Results Six months after chemotherapy, the prevalence of regular cycles was 60%. Anti-Müllerian hormone decreased down to undetectable levels at T2 and T3 (T1: 2.53 [1.00–5.31]; T2 < 0.08; T3: < 0.08 [< 0.08–1.07] ng/mL), (p< 0.0001). Antral follicle count was 11 [8.0–13.5] follicles at T1 and lower at T2 (5.50 [3.75–8.0] and T3 (5.0 [2.5–7.0]) (p< 0.0001). In patients who remained with regular cycles during chemotherapy or resumed normal menses, FSH and estradiol levels remained unchanged. Conclusion Anti-Müllerian hormone and AFC are useful as markers of OVR decline in women exposed to chemotherapy. Follicle-stimulating hormone is only adequate in women who become amenorrheic.

Resumo Objetivo Avaliar a reserva ovariana (OVR) através da contagem de folículos antrais (AFC), dosagem sérica de hormônio folículo estimulante (FSH) e hormônio anti-Mülleriano (AMH) em mulheres com câncer de mama submetidas a quimioterapia gonadotóxica. Método Foram incluídas na pesquisa 52 mulheres (35,3 ± 3,8 anos) com câncer de mama, em tratamento com quimioterapia com ciclofosfamida. As dosagens e medidas foram realizadas antes do início da quimioterapia (T1) e após 2 (T2) e 6 meses (T3). Resultados Seis meses após quimioterapia, a prevalência de ciclos regulares foi de 60%. O AMH sérico diminuiu a níveis indetectáveis em T2 e T3 (T1: 2,53 [1,00–5,31] ]; T2 < 0,08; T3: < 0,08 [< 0,08–1,07] ng/mL) (p< 0,0001). A contagem de folículos antrais foi de 11 [8,0–13,5] folículos em T1, e ainda menor em T2 (5,50 [3,75–8,0] e T3 (5,0 [2,5–7,0]), (p< 0,0001). Em pacientes que mantiveram ciclos regulares durante a quimioterapia ou retomaram a menstruação normalmente, os níveis de FSH e estradiol permaneceram inalterados. Conclusão O AMH e a AFC são marcadores úteis do declínio da OVR em mulheres expostas à quimioterapia. O FSH só é adequado em mulheres que se tornam amenorreicas.

Tear osmolarity and tear function assessment in patients with polycystic ovary syndrome / Avaliação da osmolaridade lacrimal e da função lacrimal em pacientes com síndrome dos ovários policísticos

ABSTRACT Purpose: Polycystic ovary syndrome (PCOS) is an endocrine disease characterized by chronic anovulation and hyperandrogenism. Hormonal changes can affect tear function. This study evaluates tear function and impact of hyperandrogenism on it in PCOS patients. Methods: Fifty patients with PCOS and thirty control volunteers were examined for tear break-up time, Schirmer-I and tear osmolarity. Also, serum levels of total testosterone, FSH, LH and AMH were determined in venous blood samples in the early follicular phase. PCOS patients were divided into two groups by plasma total testosterone level: Group A with normal (≤0.513 ng/ml;n=27), Group B with higher hormone level (>0.513 ng/ml;n=23). Healthy control group indicated as Group C (n=30). Results: LH, total testosterone levels were higher in the PCOS group than in the control group (p=0.012; p=0.025). Mean values of tear break-up time and Schirmer-I were different between groups and especially Group A and C were near to each other differing from B (p>0.05). Tear osmolarity results were higher in Group B, compared to A and C (p=0.049; p=0.033). No significant difference detected in tear osmolarity value means of Group A and C (p=0.107). AMH levels were higher in Group B, compared to A and C (p=0.002; p=0.001). AMH levels in Group A were higher than that of C (p=0.002). Positive correlation between levels of total testosterone and AMH was detected in all PCOS patients (n=50;Pearson's r=0.579; p<0.001). Conclusion: Tear function can be affected in PCOS patients with hyperandrogenism. Tear osmolarity is the most sensitive and objective assessment method for ocular surface changes in PCOS.

RESUMO Objetivo: A síndrome do ovário policístico (SOP) é uma doença endócrina caracterizada por anovulação crônica e hiperandrogenismo. As alterações hormonais podem afetar a função cardíaca. Este estudo avalia a função lacrimal e o impacto do hiperandrogenismo sobre ela em pacientes com SOP. Métodos: Cinquenta pacientes com SOP e trinta voluntárias de controle foram examinadas para tempo de ruptura lacrimal, Schirmer-I e osmolaridade lacrimal. Além disso, os níveis séricos de testosterona total, FSH, LH e HAM foram determinados em amostras de sangue venoso na fase folicular precoce.As pacientes com SOP foram divididas em dois grupos por nível de testosterona plasmática total: Grupo A com nível normal (≤0.513 ng/ml; n = 27), Grupo B com nível superior de hormônio (> 0,513 ng/ml; n = 23). Grupo de controle saudável indicado como Grupo C (n = 30). Resultados: Os níveis de LH e testosterona total foram maiores no grupo com SOP do que no grupo controle (p = 0,012; p = 0,025). Os valores médios de tempo de ruptura lacrimal e Schirmer-I foram diferentes entre os grupos, e especialmente os Grupos A e C estavam próximos um do outro, diferente do B (p > 0,05). Os resultados de osmolaridade lacrimal foram maiores no Grupo B, em comparação com A e C (p = 0,049; p = 0,033). Não houve diferença significativa detectada em valor médio de osmolaridade lacrimal nos Grupos A e C (p = 0,107). Os níveis de HAM foram maiores no Grupo B, em comparação com A e C (p = 0,002; p = 0,001). Os níveis de AMH no Grupo A foram superiores aos de C (p = 0,002). Uma correlação positiva entre os níveis de testosterona total e AMH foi detectada em todas as pacientes com SOP (n = 50; Pearson's r = 0,579; p < 0,001). Conclusão: a função lacrimal pode ser afetada em pacientes com SOP com hiperandrogenismo. A osmolaridade lacrimal é o método de avaliação mais sensível e objetivo para alterações da superfície ocular em SOP.

Individualization of controlled ovarian stimulation in vitro fertilization using markers of ovarian reserve: a systematic review / Individualização da estimulação ovariana controlada na fertilização in vitro com o uso de marcadores da reserva ovariana: uma revisão sistemática

Introduction: The main objective of individualization of treatment in IVF is to offer every single woman the best treatment tailored to her own unique characteristics, thus maximizing the chances of pregnancy and eliminating the iatrogenic and avoidable risks resulting from ovarian stimulation. Personalization of treatment in IVF should be based on the prediction of ovarian response. Objective: To summarize the predictive ability of ovarian reserve markers, and the therapeutic strategies that have been proposed in IVF after this prediction. Methods: A systematic review of the existing literature was performed by searching Medline, LILACS, SciELO and Pubmed, for publications related to ovarian reserve markers and their incorporation into controlled ovarian stimulation (COS) protocols in IVF. Results: 251 articles were found. Ten articles published between 2010 and 2015 were selected. Conclusion: Antral follicle count (AFC) and anti-Mullerian hormone (AMH), the most sensitive markers of ovarian reserve, are ideal in planning personalized COS protocols. These markers permit prediction of the ovarian response with reliable accuracy. Following the categorization of expected ovarian response clinicians can adopttailored therapeutic strategies for each patient.(AU)

Introdução: O principal objetivo da individualização do tratamento na fertilização in vitro é oferecer a cada mulher o melhor tratamento sob medida para suas próprias características únicas, maximizar, assim, as chances de gravidez e eliminar os riscos de iatrogenia durante a estimulação ovariana. A personalização do tratamento na fertilização in vitro deve basear-se na predição da resposta ovariana. Objetivo: Avaliar o uso de marcadores da reserva ovariana para individualização da dose inicial do FSH nos ciclos de FIV. Métodos: Revisão sistemática da literatura feita por meio de pesquisa Medline, Lilacs, SciELO e PubMed, para publicações relacionadas com marcadores reserva ovariana e sua incorporação, estimulação ovariana (COS) e protocolos controlados em fertilização in vitro. Resultados: Foram achados 251 artigos. Foram selecionados dez artigos publicados entre 2010 e 2015. Conclusão: Contagem de folículos antrais (AFC) e hormônio anti-Müulleriano (AMH), os marcadores mais sensíveis da reserva ovariana, são ideais no planejamento de protocolos individualizados. Esses marcadores permitem previsão da resposta ovariana com confiança De acordo com a resposta ovariana esperada, os clínicos podem adotar estratégias terapêuticas sob medida para cada paciente.(AU)

Hormônio anti-Mülleriano como preditor de reserva ovariana em pacientes lúpicas: uma revisão / Anti-Müllerian hormone levels as a predictor of ovarian reserve in systemic lupus erythematosus patients: a review

RESUMOO hormônio anti-Mülleriano (HAM) é secretado a partir das células da granulosa dos folículos ovarianos em crescimento e parece ser o melhor marcador endócrino capaz de estimar a reserva ovariana. O lúpus eritematoso sistêmico (LES) é uma doença autoimune que acomete predominantemente mulheres em idade reprodutiva e pode afetar negativamente sua fertilidade pela atividade da doença, bem como pelos tratamentos usados. Conhecer o real impacto do LES e de seu tratamento na fertilidade vem sendo o objetivo de estudos recentes, os quais têm usado o HAM para esse fim.

ABSTRACTThe anti-Müllerian hormone (AMH) is secreted from granulosa cells of growing ovarian follicles and appears to be the best endocrine marker capable of estimating ovarian reserve. Systemic lupus erythematosus (SLE) is an autoimmune disease that predominantly affects women of reproductive age and may negatively affect their fertility due to disease activity and the treatments used. Recently, several studies assessed AMH levels to understand the real impact of SLE and its treatment on fertility.

Revisão sistemática da variação da contagem de folículos antrais ovarianos durante o ciclo menstrual / Systematic review of ovarian antral follicle count variation during menstrual cycle

Objetivo: Fazer revisão dos estudos que avaliaram a variação da contagem de folículos antrais ovarianos durante o ciclo menstrual de mulheres eumenorreicas. Método: Foi feita revisão sistemática de trabalhos que tiveram como objetivo avaliar a variação da contagem de folículos antrais ovarianos no ciclo menstrual publicados nos últimos 16 anos e disponíveis nas bases de dados científicas Medline, Lilacs e Scielo. Os descritores de busca foram reserva ovariana, contagem de folículos antrais, ciclo menstrual e variação intraciclo. Resultados: Verificou-se a existência de 920 artigos. Foram selecionados sete publicados de 2002 a 2013. Quatro eram estudos prospectivos, um tratava-se de uma revisão sistemática e dois eram estudos experimentais. Conclusão: A contagem de folículos antrais ovarianos parece não sofrer variação significativa no ciclo menstrual, principalmente quando se medem folículos antrais pequenos (2-6 mm).

Objective: To make a review of studies that assessed the variation in ovarian antral follicle count during menstrual cycle eumenorrheic women. Method: A systematic review of studies that aimed to evaluate the variation of antral follicle count in the menstrual cycle from the last 16 years and that were available in scientific databases Medline, Lilacs and Scielo was performed. The descriptors searched were ovarian reserve, antral follicle count, menstrual cycle and intra-cycle variation. Results: 920 articles were found. From these, four of the 7 studies published in the years 2002 to 2013 were prospective studies, 1 was a systematic review and 2 were experimental studies. Conclusion: The ovarian antral follicle count does not seem to suffer significant variation in the menstrual cycle, especially when measuring small antral follicles (2-6 mm).

Importância do hormônio anti-Mülleriano na infertilidade / The importance of anti-Müllerian hormone in infertility

O hormônio anti-Mülleriano (HAM) é um marcador da reserva ovariana usado em técnicas de reprodução assistida com o objetivo de predizer a resposta inadequada à estimulação ovariana controlada. Também pode ser útil na predição de hiper-respostas em pacientes com síndrome dos ovários policísticos e colaborar para individualizar protocolos de estimulaçãomais adequados ao perfil de cada paciente e para o sucesso final do tratamento, muitas vezes dispendioso. Além do HAM existem outros marcadores da reserva ovariana, comocontagem de folículos antrais (CFA) e hormônio folículo estimulante (FSH), juntamente com o Estradiol (E2) e a Inibina B.

The Anti-Müllerian Hormone (AMH) is a marker of ovarian reserve used in assisted reproductive technologies, aiming at predict the response to controlled ovarian stimulation. Itmay also be useful for the prediction of hyperresponse to ovarian stimulation, as frequently observed in patients with Polycystic Ovary Syndrome. Being so, it is useful to individualize ovarian stimulation protocols, making the treatment more cost-effective. Besides AMH, there are other markers of ovarian reserve, as antral follicle count (AFC), Follicle Stimulating Hormone (FSH) along with Estradiol (E2) and inhibin B.

Hormônio anti-Mülleriano sérico para predição da resposta ovariana em ciclos de reprodução assistida / Serum anti-Müllerian hormone to predict ovarian response in assisted reproduction cycles

OBJETIVOS: Comparar as concentrações séricas do hormônio anti- Mülleriano (AMH) no sétimo dia de estimulação ovariana em pacientes boas e más respondedoras. MÉTODOS: Foram incluídas 19 mulheres com idade ≥35 anos, ciclos menstruais regulares e que foram submetidas à estimulação ovariana para reprodução assistida. Foram excluídas mulheres portadoras de endometriose ou síndrome dos ovários policísticos ou aquelas submetidas previamente à cirurgia ovariana. Foram coletadas amostras de sangue periférico no dia basal e no sétimo dia de estimulação para dosagens de AMH, hormônio folículo estimulante (FSH) e estradiol. Os níveis de AMH foram avaliados pelo método de enzimoimunoensaio (ELISA) e os níveis de FSH e estradiol foram avaliados por imunoquimioluminescência. Ao final do ciclo, as pacientes foram classificadas como normo (obtenção de quatro ou mais oócitos durante a captação) ou más respondedoras (obtenção de menos de quatro oócitos ou cancelamento do ciclo por má resposta) e analisadas comparativamente em relação aos níveis hormonais, duração da estimulação ovariana, número de folículos recrutados, embriões produzidos e transferidos através do teste t. A associação entre os níveis de AMH e os parâmetros acima também foi avaliada pelo teste de correlação de Spearman. RESULTADOS: Não houve diferença significativa entre os grupos para os níveis de AMH, FSH e estradiol no dia basal e no sétimo dia de estimulação ovariana, sendo observada correlação significativa entre os níveis de AMH do sétimo dia e a quantidade total de FSH exógeno utilizada (p=0,02). CONCLUSÕES: Os níveis de AMH obtidos no sétimo dia do ciclo de estimulação ovariana não parecem predizer o padrão de resposta ovariana, não sendo recomendadas as suas dosagens para esta finalidade.

PURPOSE: To compare serum anti-Mullerian hormone (AMH) levels on the seventh day of ovarian stimulation between normal and poor responders. METHODS: Nineteen women aged ≥35, presenting with regular menses, submitted to ovarian stimulation for assisted reproduction were included. Women with endometriosis, polycystic ovarian syndrome or those who were previously submitted to ovarian surgery were excluded. On the basal and seventh day of ovarian stimulation, a peripheral blood sample was drawn for the determination of AMH, FSH and estradiol levels. AMH levels were assessed by ELISA and FSH, and estradiol by immunochemiluminescence. At the end of the stimulation cycle patients were classified as normal responders (if four or more oocytes were obtained during oocyte retrieval) or poor responders (if less than four oocytes were obtained during oocyte retrieval or if the cycle was cancelled due to failure of ovulation induction) and comparatively analyzed by the t-test for hormonal levels, length of ovarian stimulation, number of follicles retrieved, and number of produced and transferred embryos. The association between AMH and these parameters was also analyzed by the Spearman correlation test. RESULTS: There was no significant difference between groups for basal or the seventh day as to AMH, FSH and estradiol levels. There was a significant correlation between seventh day AMH levels and the total amount of exogenous FSH used (p=0.02). CONCLUSIONS: AMH levels on the seventh day of the ovarian stimulation cycle do not seem to predict the pattern of ovarian response and their determination is not recommended for this purpose.

Analysis of anti-Müllerian hormone (AMH) and its receptor (AMHR2) genes in patients with persistent Müllerian duct syndrome / Pesquisa de mutações nos genes do hormônio antiMülleriano (AMH) e do seu receptor (AMHR2) em pacientes com síndrome de persistência dos ductos Müllerianos

OBJECTIVE: To screen for mutations in AMH and AMHR2 genes in patients with persistent Müllerian duct syndrome (PMDS). PATIENTS AND METHOD: Genomic DNA of eight patients with PMDS was obtained from peripheral blood leukocytes. Directed sequencing of the coding regions and the exon-intron boundaries of AMH and AMHR2 were performed. RESULTS: The AMH mutations p.Arg95*, p.Arg123Trp, c.556-2A>G, and p.Arg502Leu were identified in five patients; and p.Gly323Ser and p.Arg407* in AMHR2 of two individuals. In silico analyses of the novel c.556-2A>G, p.Arg502Leu and p.Arg407* mutations predicted that they were harmful and were possible causes of the disease. CONCLUSION: A likely molecular etiology was found in the eight evaluated patients with PMDS. Four mutations in AMH and two in AMHR2 were identified. Three of them are novel mutations, c.556-2A>G, and p.Arg502Leu in AMH; and p.Gly323Ser in AMHR2. Arq Bras Endocrinol Metab. 2012;56(8):473-8.

OBJETIVO: Analisar os genes AMH e AMHR2 em indivíduos com síndrome de persistência dos ductos de Müller (SPDM). PACIENTES E MÉTODO: Amostras de DNA genômico de oito pacientes com SPDM foram obtidas de leucócitos de sangue periférico. Sequenciamento direto da região codificadora e das áreas intrônicas próximas aos éxons dos genes AMH e AMHR foi realizado. RESULTADOS: As mutações p.Arg95*, p.Arg123Trp, c.556-2A>G e p.Arg502Leu no gene AMH foram identificadas em cinco pacientes e as mutações p.Gly323Ser e p.Arg407* no gene AMHR2, em dois indivíduos. As análises in silico das mutações c.556-2A>G, p.Arg502Leu e p.Arg407*, não descritas anteriormente na literatura, previram que elas são deletérias e possivelmente a causa da doença. CONCLUSÃO: Uma provável etiologia molecular foi encontrada nos oito pacientes portadores de SPDM avaliados. No gene do AMH foram identificadas quatro mutações e no AMHR2, duas mutações. Três das seis mutações encontradas são mutações novas, c.556-2A>G e p.Arg502Leu no gene AMH; e p.Gly323Ser no AMHR2. Arq Bras Endocrinol Metab. 2012;56(8):473-8.

Avaliação da reserva ovariana / Assessment of ovarian reserve

A diminuição da reserva ovariana é um processo de declínio da fecundidade associado tanto à depleção folicular dos ovários quanto à piora da qualidade oocitária que ocorre com o avanço da idade feminina. Na tentativa de avaliar a reserva ovariana, são realizados testes, como a medida do volume ovariano, a contagem dos folículos antrais do ovário, a dosagem basal do hormônio folículo-estimulante, a dosagem de inibina-B, do hormônio anti-mülleriano e o teste do clomifeno. A contagem folicular antral associada ao hormônio folículo-estimulante basal parece ser a abordagem de menor custo na avaliação do casal infértil, mas a contagem folicular antral associada aos níveis séricos de anti-mülleriano tem o maior poder preditivo de sucesso no tratamento de reprodução assistida.

The ovarian reserve diminution is a fecundity decrease process associated both to the follicular depletion of the ovaries as well as to the decline of the oocyte quality that happens due to female ageing. Tests like the ovarian volume measurement, the ovarian basal antral follicle counting, the basal follicle-stimulating hormone level, the dosage of the inhibin B and of the anti-Müllerian hormone, and the clomiphene citrate challenge test are made trying to evaluate the ovarian reserve. The basal antral follicle count associated to the basal follicle-stimulating hormone dosage seems to be the lowest cost approach in the evaluation of the infertile couple, but the basal antral follicle count associated to the serum anti-Müllerian levels has higher success predictive power in the assisted reproduction treatment.